HE染色
产品简介:
苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。HE染色是组织学、病理学教学与科研中最基础、使用最广泛的技术方法之一,常用于组织形态结构的观察。
1、石蜡切片脱蜡至水,自来水洗。
2、切片入苏木素染液A染3-5min,自来水洗,苏木素分化液B分化3-5s,自来水洗,苏木素返蓝液C返蓝3-5s,流水冲洗。
3、切片依次入85%、95%的梯度酒精脱水各5min,入伊红染液D中染色3-5min。
4、切片直接依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲Ⅰ5min- 二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
5、显微镜镜检,图像采集分析。
细胞爬片染色步骤:
1、细胞爬片经4%的多聚甲醛固定15min,PBS洗三次,
2、破膜液破膜20min,纯水洗三次。
3、吸取苏木素染液A滴入孔板覆盖爬片,染色3-5min,弃去染色液,自来水洗,苏木素分化液B分化3-5s,自来水洗,苏木素返蓝液C返蓝3-5s,自来水洗。
3、依次滴入85%、95%的梯度酒精脱水各5min,滴入伊红染液D覆盖爬片,染色3-5min。
4、弃去依红染色液,滴入无水乙醇覆盖爬片,脱水三次,每次5min ,弃无水乙醇,65℃烤干,中性树胶封片。
5、显微镜镜检,图像采集分析。
结果:
细胞核呈蓝色至蓝紫色,细胞质呈红色。
注意事项:
1、注意细胞核的分化程度;
2、注意苏木素和伊红的效价,及时更换染液。